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猫瘟病毒检测卡的检验步骤和方法

更新时间:2022-05-20 点击次数:2129
  猫瘟病毒检测卡由预包被猫瘟病毒重组E2蛋白的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测猪血清、血浆样本中猫瘟病毒抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本,经温育后若样品中含有猫瘟病毒抗体,则将与酶标板上抗原结合,经洗涤除去未结合的其他成分后.
  再加入酶标记物,与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶标记物,在孔中加TMB底物液,与酶反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有猫瘟病毒抗体。
  猫瘟病毒检测卡的检验步骤和方法:
  1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
  2.取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
  3.空白对照孔加样品稀释液100μl;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
  4.混匀,置37℃反应30分钟。
  5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
  6.每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
  7.洗涤,同步骤5。
  8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
  9.每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。

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